尼氏染色

      尼氏染色（Nissl Staining）是用碱性染料染神经组织的一种方法。尼氏体是胞质内的一种嗜碱性物质，广泛见于各种神经元，不同神经元中的尼氏体形状、大小和数量则各有差异。用于尼氏染色的碱性染料主要有焦油紫、亚甲蓝、甲苯胺蓝和硫堇等。我室主要用焦油紫和硫堇染色。尼氏染色法可以染出尼氏体，用来观察神经元内的细胞结构；还可以通过尼氏染色后对尼氏体的观察来了解神经元的损伤情况。

尼氏染色原理：神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒，即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏物质，也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。各种神经细胞内都含有尼氏体，但其形状、数量、分布位置常常不同。尼氏体也存在于树突中，但不在于轴突和包体的轴丘。尼氏体会因为生理状态的变化而变化，尼氏体是神经元内合成蛋白质合成的重要部位，当神经元受到刺激后，包体内的尼氏体会明显减少。通常尼氏能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。常用的碱性染料有Cresyl violet (焦油紫，甲酚紫，克紫）；thionine (硫荲)；tolridine blue (甲苯胺蓝)等

尼氏染色步骤：

1.常规脱蜡至水（二甲苯I、二甲苯II各15min，然后梯度酒精脱水：100%I、100%II、95%、90%、80%、70%、50%各5min）

2.蒸馏水冲洗3次，每次5min

3.然后置于60℃温箱用1%甲苯胺蓝染色40 min(或用焦油紫染色30s)

4.蒸馏水洗净染料后，于分别置于70%，80%和95%以及100%乙醇中脱水，再用二甲苯透明

5.后用中性树胶封片。

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