荧光原位杂交技术fish检测的基本原理是将DNA(或RNA)探针用特殊的核苷酸分子标记,然后将探针直接杂交到染色体或DNA纤维切片上,再用与荧光素分子偶联的单克隆抗体与探针分子特异性结合来检测DNA序列在染色体或DNA纤维切片上的定性、定位、相对定量分析。
荧光原位杂交技术fish检测技术是利用荧光标记的特异性寡核苷酸片段作为探针,与染色体、细胞或组织中的核酸按照碱基互补配对原则进行杂交,通过荧光系统检测,对待测DNA进行定性或相对定位分析。相对于传统的核型分析技术,FISH技术具有快速及特异性高的优点。更由于其直观性,成为众多遗传学诊断技术的有效验证方法,具有广阔的应用前景。
荧光原位杂交技术fish检测技术有哪些主要优势?
① 安全、快速、灵敏度高;
② 探针能较长时间保存;
③ 多色标记,简单直观;
④ 可用于中期染色体及间期细胞的分析;
⑤ 可应用于新鲜、冷冻或石蜡包埋标本以及穿刺物和脱落细胞等多种物质的检测。
荧光原位杂交技术fish检测的技术是一种重要的非放射性原位杂交技术。它的基本原理是:如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的,二者经变性-退火-复性,即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应,经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。
荧光原位杂交技术fish检测技术系用荧光基团标记特异性探针,再将标记了荧光信号的探针与待测样本进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数。通过荧光信号的颜色和数目的异常与否,达到对染色体疾病诊断、恶性肿瘤预测及预后判断的目的。
荧光原位杂交技术fish检测技术不但可用于已知基因或序列的染色体定位,而且也可用于未克隆基因或遗传标记及染色体畸变的研究。在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。