荧光定量Q-PCR检测为何会如此受欢迎,要从两个问题入手,个荧光定量Q-PCR是什么?荧光定量Q-PCR检测作用是什么?弄清楚这两个问题,就知道了!
首先我们来分析个问题——什么是荧光定量Q-PCR?,从概念上讲,荧光定量PCR全英文名为Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction,Q-PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对反应体系中未知模板进行量化分析的方法。
因为这个方法有三个优势,分别是属性强、灵敏度高、准确度高,所以应用甚广,但凡事都是两面的,在荧光定量PCR应用过程中,让人棘手头疼的问题便是污染,污染轻则导致实验失败,重则瘫痪整个实验室,可以说污染得以控制荧光定量PCR实验便成功了一半。
常见的污染形式是:荧光定量PCR反应体系经过不断升降温,液体蒸发又冷凝,PCR管内很容易形成携带有大量DNA扩增片段的气溶胶,气溶胶容易泄露扩散(如打开扩增管盖、扩增管破裂等)而污染实验室
所以由此可见,荧光定量Q-PCR检测存在的必要,也就是荧光定量Q-PCR检测的作用,就是为了试验安全,试验者的人生安全。
荧光定量Q-PCR检测可以实现对污染的监控,比如可以检测实验分区是否存在气溶胶污染,监控方法为将去离子水放置实验区域2-3h后,将该去离子水作为模板扩增,去离子水可在实验室多点放置。
荧光定量Q-PCR检测是可以知道仪器(如离心机、移液枪把手等)表面是否被污染,用无菌棉签蘸取去离子水擦拭仪器及试验台表面,取少量液体做为模板进行扩增。
同时还能检测移液枪是否被污染,用移液枪反复吹打无污染的去离子水,将该去离子水作为模板扩增。以及试剂是否被污染,将试剂做为阴性模板进行扩增。
看完以上讲解,您是不是对荧光定量Q-PCR检测为何广受市场欢迎有一定的了解了呢,如果您需要了解更多荧光定量Q-PCR检测等相关信息,欢迎咨询毓秀生物科技(上海)有限公司!